何為熱滅活？

經(jīng)常使用血清作為添加劑來培養(yǎng)細(xì)胞的小伙伴，對(duì)熱滅活應(yīng)該都不陌生。

一般情況下，血清的滅活是指解凍后的血清，通過水浴加熱的方式，將其加熱至56℃維持30分鐘，或者40℃維持20分鐘，以達(dá)到滅活補(bǔ)體的目的。

補(bǔ)體是什么？

既然熱滅活的主要針對(duì)補(bǔ)體，那么我們就要搞清楚補(bǔ)體的是什么？有哪些基本的功能？

什么是補(bǔ)體？

補(bǔ)體是廣泛存在于人和脊椎動(dòng)物體血清及組織液中，不耐熱，活化后具有酶活性、可介導(dǎo)免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)的一類蛋白質(zhì)。

補(bǔ)體的基本功能

補(bǔ)體系統(tǒng)可通過3條既相對(duì)獨(dú)立又相互聯(lián)系的途徑被激活，從而發(fā)揮生理作用。

包括但不限于調(diào)理吞噬、裂解細(xì)胞、介導(dǎo)炎癥、免疫調(diào)節(jié)和清除免疫復(fù)合物等多種生物學(xué)效應(yīng)，包括增強(qiáng)吞噬作用，增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的趨化性；增加血管的通透性；中和病毒；細(xì)胞溶解作用；免疫反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用；刺激平滑肌收縮、細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。

血清是否均需要熱滅活？

血清的最佳工作溫度一般是在37℃左右，所以熱滅火對(duì)于血清而言，也是一種不小的傷害，會(huì)導(dǎo)致一些營養(yǎng)成分流失，進(jìn)而影響細(xì)胞狀態(tài)。

但如果所用血清中含有補(bǔ)體，且所培養(yǎng)的細(xì)胞、所涉及的實(shí)驗(yàn)對(duì)補(bǔ)體相關(guān)的蛋白較為敏感，建議進(jìn)行熱滅活處理。

胎牛血清

正規(guī)的胎牛血清，要求對(duì)5-8月胎齡（一般牛在10個(gè)月左右足月，后自然分娩）的胎牛采用心臟穿刺的方法采血，隨后進(jìn)行其他制備步驟，得到胎牛血清。

因此：

靠譜的胎牛血清，沒有形成一個(gè)完整的補(bǔ)體系統(tǒng)，不會(huì)真正地干預(yù)免疫！

非胎牛血清

新生牛血清、小牛血清、成牛血清、馬血清、豬血清這類動(dòng)物血清，一般采集自補(bǔ)體系統(tǒng)發(fā)育*的供體，因此，如果涉及以下幾個(gè)方向（包括但不限于）建議合理熱滅活。

1、免疫學(xué)研究

2、誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化

3、利用昆蟲細(xì)胞研究病毒感染

4、培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞

5、其他補(bǔ)體參與的細(xì)胞培養(yǎng)過程